Identificación de miRNAs en humor acuoso y su utilización como biomarcadores del glaucoma pseudoexfoliativo
El glaucoma es una neuropatía óptica crónica caracterizada por la degeneración progresiva de las células ganglionares de la retina y sus axones, primera causa de ceguera irreversible mundial. De elevada heterogeneidad clínica y genética, PIO elevada el principal factor de riesgo modificable. El síndrome pseudoexfoliativo representa el principal factor de riesgo identificable para el glaucoma secundario de ángulo abierto o glaucoma pseudoexfoliativo (GPEX). Es un trastorno sistémico de la matriz extracelular asociado al envejecimiento, caracterizado por el depósito progresivo de material fibrilar en diversas estructuras oculares, cuya acumulación en las vías de drenaje del humor acuoso favorece el aumento de la PIO y desarrollo de GPEX. Sin embargo, actualmente no es posible predecir qué pacientes con PEX progresarán a glaucoma. El humor acuoso constituye una matriz biológica de gran interés para la identificación de biomarcadores moleculares. En este contexto, los microARNs (miRNAs), reguladores epigenéticos de la expresión génica, y la metabolómica, que analiza los metabolitos resultantes del metabolismo celular, representan herramientas prometedoras para comprender la fisiopatología del glaucoma y desarrollar nuevas estrategias diagnósticas y terapéuticas. El objetivo principal de este trabajo es analizar la expresión de moléculas y genes en muestras de HA obtenidas en el curso de la cirugía programada de pacientes con GPAA o GPEX y compararlos con aquellos que padecen el PEX (sin glaucoma) y con sujetos operados de cirugía no complicada de cataratas, considerados grupo control (GC) con el fin de identificar biomarcadores para el diagnóstico precoz del GPEX. El estudio es multicéntrico, multidisciplinar, observacional, analítico, de corte transversal, en 265 participantes, con el propósito de determinar la firma de los miRNAs y las características metabolómicas del HA de los cuatro grupos de estudio, para establecer una nueva forma de diagnóstico molecular preclínico e identificar pacientes con PEX y mayor riesgo de desarrollar el GPEX, contribuyendo al desarrollo de nuevas bioterapias. A todos los participantes se les realizó examen oftalmológico completo y extracción de HA en el curso de la cirugía programada de segmento anterior que se procesó para analizar y cuantificar la expresión de miRNAs y metabolitos en los cuatro grupos mediante secuenciación de próxima generación, y espectroscopía 1H NMR, respectivamente. La NGS proporcionó un total de 455 miRNAs, (130 en el GPEX, y 18 con expresión diferencial entre grupos). Las concentraciones de miR-122a-5p, -146a-5p y -320a-3p mediante RT qPCR mostraron AUC notables y tendencia a la sobreexpresión en el síndrome PEX y GPEX. Sus genes diana más consistentes con la fisiopatogenia de PEX y GPEX, implican expresión de metaloproteinasas y glutamato, y vías TFGb, MAPK y Rho/ROCK. El análisis metabolómico del HA aportó diversos metabolitos discriminantes entre el síndrome PEX-GPEX vs el GPAA-GC: aminoácidos y derivados y productos del metabolismo lipídico y glucídico. La vía metabólica de mayor impacto fue la biosíntesis de fenilalanina, tirosina y triptófano. Futuros estudios con muestra más amplia y características más refinadas podrían reforzar estos hallazgos y contribuir al desarrollo de herramientas de diagnóstico precoz más precisas y accesibles, así como al descubrimiento de nuevas bioterapias GPEX
