El envejecimiento y la pérdida de los estrógenos durante la menopausia se asocian a una menor biodisponibilidad del NO, un aumento de los niveles de O2- vascular y un incremento de sustancias contráctiles, entre ellas el TXA2. Queda por determinar si los efectos deletéreos vasculares inducidos por el TXA2 durante el envejecimiento median una disminución en la biodisponibilidad de NO y un aumento en la producción de O2- y si están modulados por estrógenos. Para ello, se validó un modelo de envejecimiento vascular en ratonas con senescencia acelerada (SAM), con ratonas de la cepa SAMP8 con predisposición a la senescencia acelerada y ratonas SAMR1, con resistencia al desarrollo de senescencia acelerada y muestran un envejecimiento biológico normal, siendo utilizadas como controles. Se estudió la longevidad, la evolución de la presión arterial y se determinaron las características morfológicas y bioquímicas. Además, se estudió la respuesta vascular en aorta al KCl (5-120mM), al U46619 (10-9-3x10-5M) y a la acetilcolina (10-9-10-5M) a los 3, 6 y 10 meses de edad en ambas cepas, observándose una disfunción endotelial que aparece antes en las ratonas SAMP8 que en las ratonas SAMR1. Los resultados confirmaron que las ratonas SAM son un buen modelo para el estudio del envejecimiento vascular. Para el estudio del envejecimiento vascular y la falta de estrógenos, ambas características de la menopausia, se llevó a cabo la ovariectomía (Ovx) en ratonas SAMR1 y SAMP8 de 5 meses de edad, y se analizó el papel de los estrógenos mediante el tratamiento durante 28 días con 17ß-estradiol de ratonas SAM ovariectomizadas (OvE). Ratonas Sham control fueron utilizadas en el estudio. Se realizaron estudios bioquímicos y morfológicos que validaron la eficacia de la cirugía. Se estudió la respuesta vascular al KCl, al U46619 y a la acetilcolina en aorta de ratonas Sham, Ovx y OvE de ambas cepas. La ovariectomía disminuyó la biodisponibilidad de NO en ambas cepas de ratonas, restableciéndose con el tratamiento con 17ß-estradiol. El tratamiento con indometacina reveló el mecanismo por el cual el envejecimiento y la falta de estrógenos modificaban la respuesta contráctil en respuesta al U46619 mediante la modulación de prostanoides contráctiles y la generación de O2- dependientes de la COX. La participación de las isoformas de la COX se determinó mediante el uso de un inhibidor específico de la COX-1 (SC560, 10-7M) y de la COX-2 (celecoxib, 10-5M). La COX-1 participa en la disminución de la biodisponibilidad del NO y el incremento de O2- en ausencia de estrógenos en ambas cepas. La COX-2 participa en la contracción al TXA2 mediante la producción de sustancias vasoconstrictoras, aumentadas en SAMP8 y potenciadas con la falta de estrógenos. La ovariectomía induce la producción de O2- derivado de COX-2 en ratonas SAMR1 y SAMP8. En conjunto, los resultados muestran una mayor participación del TXA2 en la disminución de la biodisponibilidad de NO endotelial con el envejecimiento, potenciada por la falta de estrógenos y señalan a los receptores del TXA2 como posible diana terapéutica para la mejora de la función vascular en mujeres postmenopáusicas.

Both ageing and the loss of estrogen that occur during menopause are associated with a lower NO bioavailability, an increase in vascular O2- levels, and an increase in contractile substances, including TXA2. However, it remains to be determined if the vascular deleterious effects of TXA2 during ageing are mediated by an increase in O2- production and a decrease in NO bioavailability and if these effects are modulated by estrogen. For this purpose, we have validated a vascular ageing model using accelerated senescence mice (SAM), which includes the SAMP8 strain that has predisposition to the accelerated senescence, and SAMR1 strain which exhibit resistance to the development of an accelerated senescence, and have been used as control. Longevity study, blood pressure monitoring, and morphological and biochemical determinations have carried out. Moreover, the aortic vascular response to KCl (5 - 120 mM), U46619 (10-9 - 3x10-5 M) and acetylcholine (10-9 - 10-5 M) has been studied at 3-, 6- and 10-month-old female mice of both strains. The results indicated that endothelial dysfunction occurs earlier in SAMP8 than SAMR1 mice. The results confirmed that the SAM mice are a good model for the study of vascular ageing. For the study of vascular ageing and lack of estrogen, both characteristics of the menopause, ovariectomy (Ovx) was performed to 5-month-old SAMR1 and SAMP8 mice and the role of estrogens was analyzed by treating ovariectomized SAM with 17ß-estradiol (OvE) during 28 days. Sham-operated female mice were also included. Biochemical and morphological studies were carried out in order to validate the efficacy of the surgery. Concentration-response curves to KCl, U46619, and acetylcholine were performed in aortic rings of Sham, Ovx and OvE mice. Ovariectomy decreased the NO bioavailability in both strains of mice, an effect that was reestablished with 17ß-estradiol treatment. Indomethacin treatment (10-5 M) revealed that ageing and lack of estrogen modify the contractile response to U46619 through the modulation of contractile prostanoids and COX-derived O2-. The participation of COX isoform was analyzed by using the specific inhibitor of COX-1 (SC560, 10-7 M) and the specific inhibitor of COX-2 (celecoxib, 10-5 M). The results indicated the involvement of COX-1 in the decrease of NO bioavailability and increase of O2- in the absence of estrogens in both strains. COX-2 participates in the contraction to TXA2 through the production of vasoconstrictive substances that are increased in SAMP8 mice and further enhanced by ovariectomy. Moreover, ovariectomy induces a COX-2-dependent O2- production in SAMR1 and SAMP8 mice. Overall, the results show a greater TXA2 participation in the decrease of the endothelial NO bioavailability with ageing that is enhanced by the lack of estrogen, and suggests TXA2 receptors as a possible therapeutic target for the improvement of vascular function in postmenopausal women.