RESUMEN: Padecer diabetes tipo 2 (DM2) ejerce un efecto independiente y multiplicador en la incidencia de complicaciones vasculares, añadido a la presencia de factores de riesgo clásicos. No todos los diabéticos desarrollan con la misma gravedad la vasculopatía periférica (VP). Este riesgo está presente en la fase de prediabetes, donde las complicaciones vasculares pueden preceder a la aparición de la propia diabetes. La biología vascular ha puesto de manifiesto la participación de otros factores como el estrés oxidativo (EO) y el estado crónico inflamatorio en el incremento de este riesgo. Los principales sistemas conocidos de EO a nivel endotelial generan especies reactivas de oxígeno. Para compensar este exceso oxidante nuestro organismo utiliza sistemas antioxidantes; los principales son la superóxido dismutasa, la catalasa y el sistema glutatión (GSS, GSR, GPX). Los enzimas pro y antioxidantes son codificados por genes, en los que han sido descritos numerosos polimorfismos. Creemos básico conocer los factores, que junto a los clásicos, se asocian con la VP del diabético. Probablemente su conocimiento facilitará la prevención y el tratamiento evitando sus elevadas consecuencias sociales y sanitarias. Con estas premisas la hipótesis de trabajo es: en los pacientes con DM2 debe existir un incremento de marcadores de EO (homocisteína y sistema glutatión) relacionados con la VP; en este sentido, es probable que determinados polimorfismos de genes que regulan estos marcadores se asocien con la presencia de VP. Para evaluar la hipótesis se plantean los siguientes objetivos; el primario: estudiar y analizar la asociación de marcadores de EO y sistemas antioxidantes con la VP diabética; y los secundarios: 1. Estudiar la relación de marcadores de EO y sistemas antioxidantes (homocisteína, malonildialdehído y sistema glutatión) con la presencia y grado de VP en sujetos con DM2. 2. Conocer y analizar cómo diferentes polimorfismos relacionados con el EO se asocian con la presencia y grado de VP. 3. Establecer marcadores biológicos de riesgo para la VP en los pacientes con DM2. Se incluyen 204 diabéticos tipo 2 seleccionados de forma consecutiva para un estudio observacional de caso/control; de los cuales quedan, dados los criterios de exclusión, 165 diabéticos (81 mujeres y 84 hombres). Se consideran casos a los diabéticos con VP, definida por un índice de ITB menor de 0,9, como expresión de macroangiopatía diabética que afecta a los distintos territorios arteriales. Y controles a los diabéticos con ITB entre 0,9 y 1,20. En todos ellos se determina parámetros clínico, antropométrico, bioquímicos relacionados con la VP y polimorfismos genético de xantino oxidasa (xo-337A>G, xo-565+64T>C, xo-1936A>G) y homocisteína (MTHFR 1298, MTHFR 677 y CBS 1080). Tras analizar los resultados establecemos las siguientes conclusiones: 1. La presencia de macroangiopatía diabética evaluada por ITB se relaciona significativamente con el cociente LDL/HDL y el tratamiento de dislipemia, con el fibrinógeno y niveles plasmáticos de homocisteína, así como con los antecedentes isquémicos cardíacos y edad. 2. No se encuentra asociación con los polimorfismos genéticos relacionados con el EO estudiados. 3. En un subgrupo seleccionado de forma aleatoria de la cohorte de diabéticos tipo 2 con criterios estricto de apareamiento por edad, sexo, IMC, gravedad de ITB y tiempo de evolución de la diabetes: existe elevación de los productos de oxidación y descenso de los sistemas antioxidantes, no existen diferencias significativas en los marcadores de EO estudiados entre los grupos según tengan ITB patológico o normal y finalmente los marcadores de EO se correlacionan con los niveles plasmáticos de triglicéridos y de homocisteína.

ABSTRACT: To suffer type 2 diabetes mellitus (DM2) exerts an independent and multiplier effect on the vascular complications incidences, which is added to the presence of classical risk factors. Not all diabetic patients develop the peripheral vasculopathy with the same severity, this risk is present in the pre-diabetes phase, where the vascular complications might precede the diabetes diagnosis. Vascular biology has revealed the involvement of others factors such as the oxidative stress and the chronic inflammatory condition when the cardiovascular risk is increased. The main known systems of oxidative stress (OS) in the endothelium generate reactive oxygen species. To compensate the oxidant excess our organism uses antioxidant systems; the main ones are the superoxide dismutase, catalase ant the glutathione system (GSS,GSR, GPX). The pro and antioxidant enzymes are encoded by genes, in which many polymorphism have been described. We consider necessary to know the factors that with the classical are associated to the diabetic peripheral vasculopathy. Probably its diagnosis facilitate the prevention and the treatment, while avoiding its strong social and sanitary consequences. With these premises, the thesis hypothesis is: within the DM2 patients may exist an oxidative stress biomarkers (homocysteine and glutathione system) related to the vasculopathy; it is likely that certain genes polymorphisms, that regulate these biomarkers, get associated with the peripheral vasculopathy. To evaluate the hypothesis the following aims are proposed; the primary aim: to study and analyse the oxidative stress biomarkers and antioxidant systems in relation to diabetic peripheral vasculopathy; and the secondary aims are: 1. To study the relationship between the oxidative stress biomarkers and antioxidant systems (homocysteine and glutathione system) with the presence and extent of peripheral vasculopathy in patients with type 2 diabetes mellitus (DM2). 2. To understand and analyse how different polymorphisms related with the oxidative stress are associated with the presence and extent of vasculopathy. 3. To establish peripheral vasculopathy risk biomarkers in type 2 diabetes mellitus (DM2) patients. There are included 204 type 2 diabetes mellitus (DM2) patients consecutively selected for an observational case/control study; after the exclusion criteria, there are 165 diabetic patients (81 women and 84 men). There are considered case study diabetic patients with peripheral vasculopathy defined by and ankle-brachial index lower than 0,9, like a diabetic macroangiopathy expression that affects different arterial routes. And diabetic controls with and ankle-brachial index between 0,9 and 1,20. In all of them clinical, anthropometric and biochemical parameters are determinate with the peripheral valve vasculopathy and the xantio oxidasa genetic polymorphisms (xo-337A>G, xo-565+64T>C, xo-1936A>G) and homocyteine (MTHFR 1298, MTHFR 677 y CBS 1080). After analysing the results we establish the next conclusions: 1. the presence of diabetic macroangiopathy evaluated by the ankle-brachial index is significantly related with the LDL/HDL quotient and the dislipemia treatment, with the fibrinogen and the plasmatic levels of homocysteine, like the cardiac ischemic antecedents and the age. 2. Any association with the genetic polymorphism related with the oxidative stress studied is not found. 3. In a subgroup randomly selected from the cohort of type 2 diabetics (DM2) with mating strict criteria for age, sex, BMI, severity of ITB and duration of diabetes: there is an elevation of oxidative products and a decline of the antioxidant systems, it does not exist a significantly differences in the oxidative stress biomarkers studied between the groups according to whether pathological or normal ankle-brachial index and finally the oxidative stress biomarkers are correlated with plasma levels of triglycerides and homocysteine.